劉建榮課題組在FLI1 介導(dǎo) PART1 在胚胎反復(fù)種植失敗中的功能與機(jī)制研究中取得進(jìn)展
體外受精-胚胎移植（IVF-ET）是治療不孕癥最常見、最有效的方法。然而，一些不孕患者仍然經(jīng)歷反復(fù)種植失?。≧IF）。RIF病因復(fù)雜，包括胚胎質(zhì)量不佳、宮腔環(huán)境異常、內(nèi)分泌和免疫因素等。其中，子宮內(nèi)膜容受性低是主要原因，約2/3的胚胎種植失敗是由此引起。近年來(lái)，研究主要關(guān)注子宮內(nèi)膜細(xì)胞的信號(hào)蛋白異常對(duì)胚胎植入的調(diào)控機(jī)制，但子宮內(nèi)膜容受性異常的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡述清楚。探索介導(dǎo)RIF異常轉(zhuǎn)錄的關(guān)鍵調(diào)控因子對(duì)于揭示RIF的分子機(jī)制和臨床治療提供新思路，具有重要意義。
山西醫(yī)科大學(xué)第五臨床醫(yī)學(xué)院劉建榮教授課題組在PeerJ期刊發(fā)表了題為“Overexpression of FLI1 promote PART1 transcription in the endometrial epithelial cells contributing to reduced endometrial receptivity and embryo implantation failure”的研究論文。在該課題的研究中，研究人員鑒定出了調(diào)控RIF低內(nèi)膜容受性的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，并闡明了關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子FLI1在RIF中的作用與調(diào)控機(jī)制，從而揭示RIF低子宮內(nèi)膜容受性的內(nèi)在分子機(jī)制，尋找到了治療RIF低子宮內(nèi)膜容受性的潛在靶點(diǎn)，有望為RIF的防治提供新策略。該研究的主要發(fā)現(xiàn)如下：
第一部分：鑒定了RIF低內(nèi)膜容受性中發(fā)揮重要功能的細(xì)胞群及關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子
基于scATCA-seq構(gòu)建RIF患者黃體期子宮內(nèi)膜組織的單細(xì)胞染色質(zhì)可及性圖譜，鑒定到子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞是調(diào)控RIF低內(nèi)膜容受性的關(guān)鍵細(xì)胞群；進(jìn)一步結(jié)合RT-qPCR技術(shù)，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄因子FLI1在RIF子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞中染色質(zhì)可及性增強(qiáng)，且FLI1在RIF子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞中顯著上調(diào)，提示FLI1參與了RIF過(guò)程。
子宮內(nèi)膜組織中單細(xì)胞聚類分析與鑒定
FLI1在RIF患者的子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞中異常上調(diào)
第二部分：研究了關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子FLI1在胚胎種植失敗低內(nèi)膜容受性中的作用
RT-qPCR技術(shù)檢測(cè)FLI1在容受性子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞系和非容受性內(nèi)膜上皮細(xì)胞系中的表達(dá)水平變化，發(fā)現(xiàn)FLI1在非容受性內(nèi)膜上皮細(xì)胞系中的表達(dá)水平顯著高于容受性子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞系；在細(xì)胞水平實(shí)驗(yàn)揭示，過(guò)表達(dá)FLI1抑制子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞增殖、遷移、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化和胚胎粘附，而沉默F(xiàn)LI1則發(fā)揮相反功能；同時(shí)，在動(dòng)物水平實(shí)驗(yàn)揭示，子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞過(guò)表達(dá)FLI1可以顯著抑制小鼠胚胎著床。
FLI1對(duì)子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響
第三部分：揭示了上皮細(xì)胞過(guò)表達(dá)FLI1導(dǎo)致胚胎植入失敗的內(nèi)在分子機(jī)制
通過(guò)lncRNA數(shù)據(jù)挖掘、生物信息學(xué)分析以及在體實(shí)驗(yàn)鑒定到PART1是調(diào)控胚胎植入的關(guān)鍵lncRNA；通過(guò)轉(zhuǎn)錄因子-lncRNA結(jié)合能力與位點(diǎn)預(yù)測(cè)、ChIP-qPCR、雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)綜合分析，揭示在子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞中FLI1結(jié)合在PART1啟動(dòng)子上促進(jìn)PART1轉(zhuǎn)錄表達(dá)；體外細(xì)胞水平設(shè)計(jì)的挽救實(shí)驗(yàn)證明，F(xiàn)LI1通過(guò)上調(diào)PART1表達(dá)抑制子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞增殖、遷移、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化和胚胎粘附。
蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)PART1參與了FLI1對(duì)子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的抑制作用
總之，該研究發(fā)現(xiàn)了FLI1在RIF子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞中顯著上調(diào)，參與了RIF過(guò)程，并進(jìn)一步闡明了FLI1在胚胎植入中的作用及其分子機(jī)制。
山西醫(yī)科大學(xué)張軼樂(lè)博士（現(xiàn)為鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院生殖與?？漆t(yī)院副院長(zhǎng)，教授）為本文第一作者，山西醫(yī)科大學(xué)第五臨床醫(yī)學(xué)院劉建榮教授為本文的通訊作者。該研究工作得到國(guó)家自然科學(xué)基金委員會(huì)的經(jīng)費(fèi)資助。
