ABSL-3級實(shí)驗(yàn)室，供處理三級危險(xiǎn)度病原體使用，主要適用于通過吸入氣溶膠可引起嚴(yán)重致死性疾病的病原體實(shí)驗(yàn)的研究工作。
ABSL-3級實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)人員要接受在處理病原體和可能致死性微生物方面的專門培訓(xùn)，并由具有從事上述工作經(jīng)驗(yàn)的專家進(jìn)行監(jiān)督管理。傳染性材料的所有操作都要在生物安全柜或其他物理防護(hù)設(shè)備內(nèi)進(jìn)行，工作人員要穿適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)服，并配備相應(yīng)的個(gè)人防護(hù)裝備(PPE)。ABSL-3級實(shí)驗(yàn)設(shè)施要經(jīng)過專業(yè)設(shè)計(jì)和建造。
ABSL-3級實(shí)驗(yàn)室是在ABSL-2的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范，處理技術(shù)、隔離設(shè)備和實(shí)驗(yàn)室建設(shè)基礎(chǔ)上建立起來的。
實(shí)驗(yàn)室與建筑物內(nèi)一般通過通道分開。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室要通過前室(anteroom)或氣閘。實(shí)驗(yàn)室廢棄物在處理之前要進(jìn)行消毒滅菌，為此要在室內(nèi)設(shè)置一臺高壓滅菌器。另外還要設(shè)置一臺不用手操縱的洗手器。定向空氣流應(yīng)穩(wěn)定地流向?qū)嶒?yàn)室。所有傳染物的操作處理工作一定要在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。
1.設(shè)施設(shè)備要求
(1)適用時(shí)，應(yīng)符合動(dòng)物生物安全二級防護(hù)水平的要求。
(2)應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)內(nèi)設(shè)淋浴間，需要時(shí)，應(yīng)設(shè)置強(qiáng)制淋浴裝置。
(3)動(dòng)物飼養(yǎng)間屬于核心工作間，如果有入口和出口，均應(yīng)設(shè)置緩沖間。
(4)動(dòng)物飼養(yǎng)間應(yīng)盡可能設(shè)在整個(gè)實(shí)驗(yàn)室的中心部位，不應(yīng)直接與其他公共區(qū)域相鄰。
(5)適用于操作通常認(rèn)為非經(jīng)空氣傳播致病性生物因子的實(shí)驗(yàn)室的防護(hù)區(qū)應(yīng)至少包括淋浴間、防護(hù)服更換間、緩沖間及核心工作間。當(dāng)不能有效利用安全隔離裝置飼養(yǎng)動(dòng)物時(shí)，應(yīng)根據(jù)進(jìn)一步的風(fēng)險(xiǎn)評估確定實(shí)驗(yàn)室的生物安全防護(hù)要求。
(6)適用于不能有效利用安全隔離裝置操作常規(guī)量經(jīng)空氣傳播致病性生物因子的實(shí)驗(yàn)室的動(dòng)物飼養(yǎng)間的緩沖間應(yīng)為氣鎖，并具備對動(dòng)物飼養(yǎng)間的防護(hù)服或傳遞物品的表面進(jìn)行消毒滅菌的條件。
(7)適用于不能有效利用安全隔離裝置操作常規(guī)量經(jīng)空氣傳播致病性生物因子的實(shí)驗(yàn)室的動(dòng)物飼養(yǎng)間，應(yīng)有嚴(yán)格限制進(jìn)入動(dòng)物飼養(yǎng)間的門禁措施(如：個(gè)人密碼和生物學(xué)識別技術(shù)等)。
(8)動(dòng)物飼養(yǎng)間內(nèi)應(yīng)安裝監(jiān)視設(shè)備和通信設(shè)備。
(9)動(dòng)物飼養(yǎng)間內(nèi)應(yīng)配備便攜式局部消毒滅菌裝置(如：消毒噴霧器等)，并應(yīng)備有足夠的適用消毒滅菌劑。
(10)應(yīng)有裝置和技術(shù)對動(dòng)物尸體和廢物進(jìn)行可靠消毒滅菌。
(11)應(yīng)有裝置和技術(shù)對動(dòng)物籠具進(jìn)行清潔和可靠消毒滅菌。
(12)需要時(shí)，應(yīng)有裝置和技術(shù)對所有物品或其包裝的表面在運(yùn)出動(dòng)物飼養(yǎng)間前進(jìn)行清潔和可靠消毒滅菌。
(13)應(yīng)在風(fēng)險(xiǎn)評估的基礎(chǔ)上，適當(dāng)處理防護(hù)區(qū)內(nèi)淋浴間的污水，并應(yīng)對滅菌效果進(jìn)行監(jiān)測，以確保達(dá)到排放要求。
(14)適用于不能有效利用安全隔離裝置操作常規(guī)量經(jīng)空氣傳播致病性生物因子的實(shí)驗(yàn)室的動(dòng)物飼養(yǎng)間，應(yīng)根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)評估的結(jié)果，確定其排出的氣體是否需要經(jīng)過兩級HEPA過濾器的過濾后排出。
(15)適用于不能有效利用安全隔離裝置操作常規(guī)量經(jīng)空氣傳播致病性生物因子的實(shí)驗(yàn)室的動(dòng)物飼養(yǎng)間，應(yīng)可以在原位對送風(fēng)HEPA過濾器進(jìn)行消毒滅菌和檢漏。
(16)適用于操作通常認(rèn)為非經(jīng)空氣傳播致病性生物因子的實(shí)驗(yàn)室和可有效利用安全隔離裝置(如：生物安全柜)操作常規(guī)量經(jīng)空氣傳播致病性生物因子的實(shí)驗(yàn)室的動(dòng)物飼養(yǎng)間的氣壓(負(fù)壓)與室外大氣壓的壓差值應(yīng)不小于60Pa，與相鄰區(qū)域的壓差(負(fù)壓)應(yīng)不小于15Pa。
(17)適用于不能有效利用安全隔離裝置操作常規(guī)量經(jīng)空氣傳播致病性生物因子的實(shí)驗(yàn)室的動(dòng)物飼養(yǎng)間的氣壓(負(fù)壓)與室外大氣壓的壓差值應(yīng)不小于80Pa，與相鄰區(qū)域的壓差(負(fù)壓)應(yīng)不小于25Pa。
(18)適用于不能有效利用安全隔離裝置操作常規(guī)量經(jīng)空氣傳播致病性生物因子的實(shí)驗(yàn)室的動(dòng)物飼養(yǎng)間及其緩沖間的氣密性應(yīng)達(dá)到在關(guān)閉受測房間所有通路并維持房間內(nèi)的溫度在設(shè)計(jì)范圍上限的條件下，若使空氣壓力維持在250Pa時(shí)，房間內(nèi)每小時(shí)泄漏的空氣量應(yīng)不超過受測房間凈容積的10％。
(19)在適用于不能有效利用安全隔離裝置操作常規(guī)量經(jīng)空氣傳播致病性生物因子的實(shí)驗(yàn)室的動(dòng)物飼養(yǎng)間從事可傳染人的病原微生物活動(dòng)時(shí)，應(yīng)根據(jù)進(jìn)一步的風(fēng)險(xiǎn)評估確定實(shí)驗(yàn)室的生物安全防護(hù)要求；適用時(shí)，應(yīng)經(jīng)過相關(guān)主管部門的批準(zhǔn)。
2.標(biāo)準(zhǔn)微生物學(xué)操作規(guī)范
(1)除由室主任主持制定應(yīng)對緊急情況的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)程、處理方法和應(yīng)對條例外，如有需要，還可以根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定和要求，另行制定一些特殊的規(guī)章制度和技術(shù)處理方案。
(2)室主任有權(quán)決定進(jìn)入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室工作人員的數(shù)量，原則是越少越好。對實(shí)驗(yàn)過程中必須進(jìn)入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室執(zhí)行計(jì)劃和后勤供應(yīng)人員，室主任應(yīng)負(fù)責(zé)告知他們實(shí)驗(yàn)具有的潛在危險(xiǎn)性。
(3)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定適當(dāng)?shù)尼t(yī)學(xué)監(jiān)督項(xiàng)目，在ABSL-3級動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)工作的人員應(yīng)進(jìn)行合適的免疫預(yù)防接種。針對進(jìn)行實(shí)驗(yàn)中的病原體和可能潛在的疾病，還應(yīng)進(jìn)行醫(yī)學(xué)檢查和預(yù)防(如，乙肝疫苗接種，結(jié)核皮膚試驗(yàn))，如有必要，也可以應(yīng)用血清學(xué)監(jiān)測方法進(jìn)行檢查。一般來說，免疫力降低或存在免疫缺陷的人。有可能受到感染。因此實(shí)驗(yàn)室或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室不允許有傳染易感或傳染對其異常危險(xiǎn)的人在場。實(shí)驗(yàn)室主任要負(fù)責(zé)審核并決定什么人可以進(jìn)入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室或在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)工作。監(jiān)護(hù)醫(yī)生應(yīng)對所有人員進(jìn)行檢查，并作出準(zhǔn)確的評估。
(4)制定生物安全手冊，要對工作人員詳細(xì)說明工作的特殊危險(xiǎn)性，要求他們學(xué)習(xí)和遵守生物安全手冊中規(guī)定的所有規(guī)范和操作細(xì)則。
(5)在工作區(qū)內(nèi)不允許飲食、吸煙、處理隱形鏡片和使用化妝品。戴隱形鏡片的人在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)還應(yīng)戴護(hù)目鏡或面罩。食品應(yīng)貯存在工作區(qū)外指定的食品柜內(nèi)或冰箱中。
(6)要認(rèn)真仔細(xì)履行所有程序，盡量減少生成氣溶膠和濺射物。
(7)與傳染物有關(guān)的工作完成后，特別是傳染物顯性溢出、濺灑或產(chǎn)生其他污染后，實(shí)驗(yàn)室設(shè)備和工作表面應(yīng)用適當(dāng)?shù)某蹌┻M(jìn)行例行的除污工作。污染的設(shè)備必須先按當(dāng)?shù)?、國家或行業(yè)規(guī)定的規(guī)程除污，然后再送去修理或做維護(hù)保養(yǎng)。或者在設(shè)備移走前，先按當(dāng)?shù)?、國家或行業(yè)規(guī)定的規(guī)定包裝，再運(yùn)輸。要使用生物安全柜中專門用于無孔工作表面清拭的帶塑料襯底紙巾，進(jìn)行清潔工作。
(8)從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室運(yùn)出的所有廢物(包括動(dòng)物組織、尸體、污染墊料、沒有用過的飼料、銳器和其他廢棄的動(dòng)物組織)都要裝在密封帶蓋的容器內(nèi)運(yùn)出，并根據(jù)地方和國家要求和規(guī)定進(jìn)行嚴(yán)格處理。更危險(xiǎn)的廢棄物要用焚化法處理。在倒出廢物之前密封容器的外表面要進(jìn)行滅菌消毒。
(9)對受污染的銳利物品，包括針頭、灃射器、載物片、吸液管、毛細(xì)管和手術(shù)刀必須采取高度預(yù)防措施。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)要限制使用針頭和注射器或其他銳利的儀器，只在無其他替代物時(shí)才可使用，如腸道外注射、靜脈切開或從實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或隔膜瓶內(nèi)抽取液體時(shí)。應(yīng)盡可能用塑料器皿代替玻璃器皿。
(10)吸取傳染物時(shí)，只能用針頭鎖定的注射器或一次性注射器針頭(即，針頭與注射器是一個(gè)整體)。用過的一次性針頭不得折彎、剪切、破裂、翻新。從一次性注射器中除掉針頭，不得用手處理。一次性針頭必須仔細(xì)放在位置方便、專用于處理銳利物品的結(jié)實(shí)容器中。非一次性的銳利物品必須放在硬壁容器中，運(yùn)輸?shù)教幚韰^(qū)進(jìn)行除污，最好用高壓消毒器除污。
(11)必要時(shí)應(yīng)使用能夠再次封包針頭，無針頭系統(tǒng)和其他安全器件注射器。
(12)不得用手直接搬運(yùn)破損的玻璃器皿。必須用機(jī)械手段，如刷子和簸箕，夾鉗或鉗狀物搬運(yùn)。裝污染針頭、銳利設(shè)備和破損玻璃的容器，要按當(dāng)?shù)?、國家的?guī)定先除污，再做處理。
(13)工作人員在處理完細(xì)胞培養(yǎng)物，感染動(dòng)物，脫去手套之后，離開實(shí)驗(yàn)室之前要洗手。
(14)如動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室中或保護(hù)容器中有傳染物或受感染的動(dòng)物，要在實(shí)驗(yàn)室和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室門上貼上帶有通用生物危險(xiǎn)符號的危險(xiǎn)報(bào)警標(biāo)志。危險(xiǎn)報(bào)警標(biāo)志要標(biāo)明傳染媒介名稱，實(shí)驗(yàn)室主管或其他主管的姓名和電話號碼，并應(yīng)指明進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室需要遵循的特殊要求，如免疫接種、戴呼吸器或其他個(gè)人保護(hù)措施。
(15)對所有傳染樣品，要進(jìn)行仔細(xì)收集，準(zhǔn)確標(biāo)記，安全運(yùn)輸和嚴(yán)格處理，以便隔離和防止病原體向外界擴(kuò)散。
(16)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室人員要接受培訓(xùn)，內(nèi)容為與工作有關(guān)的潛在危險(xiǎn)，防止暴露的必要預(yù)防措施和暴露評定程序。工作人員每年要接受上述內(nèi)容的新培訓(xùn)，或根據(jù)程序或政策的變化增加必要的培訓(xùn)。
(17)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室主管要保證，在進(jìn)行ABSL-3的生物實(shí)驗(yàn)時(shí)，所有操作人員都要精通標(biāo)準(zhǔn)微生物操作規(guī)范和操作技術(shù)要求，都要熟練掌握實(shí)驗(yàn)室設(shè)施的操作方法和作業(yè)要求。在培訓(xùn)計(jì)劃中最好要包括曾經(jīng)有處理人體病原體和細(xì)胞培養(yǎng)的經(jīng)驗(yàn)。工作人員要經(jīng)由實(shí)驗(yàn)室主管或其他精通微生物安全規(guī)范和技術(shù)的科學(xué)工作者制定的特殊培訓(xùn)。
(18)要有行之有效的控制昆蟲和嚙齒動(dòng)物的計(jì)劃。
3.特殊操作規(guī)范
(1)動(dòng)物籠具，在取出墊料和清洗之前要經(jīng)高壓滅菌，或用常規(guī)方法消毒滅菌。然后按地方或國家規(guī)定要求進(jìn)行處理。從實(shí)驗(yàn)室、動(dòng)物室運(yùn)出的設(shè)備要進(jìn)行維修和保養(yǎng)者，也應(yīng)在包裝和運(yùn)輸之前進(jìn)行消毒。
(2)溢出的傳染物要由專業(yè)人員或接受過濃縮傳染物培訓(xùn)并配有適當(dāng)裝備的人員進(jìn)行除污、隔離和清潔。出現(xiàn)傳染物顯性暴露的溢出事故要立即向?qū)嶒?yàn)室主管報(bào)告。同時(shí)要進(jìn)行醫(yī)學(xué)評定、監(jiān)視和處理，并保留書面記錄。
(3)所有從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室運(yùn)出的廢物在焚燒或其他方法處理前，要用高壓消毒器進(jìn)行除污消毒。在靠近實(shí)驗(yàn)室外部的地方進(jìn)行除污的材料，要放在防滲的容器中密閉運(yùn)離實(shí)驗(yàn)室。在遠(yuǎn)離實(shí)驗(yàn)室的地方進(jìn)行除污的材料，要按當(dāng)?shù)?、國家?guī)定的規(guī)程包裝好，再從設(shè)施內(nèi)運(yùn)出。
(4)與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的材料(例如，動(dòng)物、植物)不允許放在動(dòng)物室內(nèi)。
