動(dòng)物生物安全二級(jí)水平實(shí)驗(yàn)室適用于對(duì)人及環(huán)境有中度危害的微生物實(shí)驗(yàn)工作。與一級(jí)生物安全水平相比,其不同點(diǎn)在于:①工作人員要經(jīng)過操作病原微生物的專門培訓(xùn),并由能勝任的專業(yè)人員進(jìn)行指導(dǎo)和管理;②工作時(shí)限制外人進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室;③某些產(chǎn)生傳染性氣溶膠或?yàn)R出物的工作要在生物安全柜或其他物理隔離設(shè)備內(nèi)進(jìn)行;④對(duì)污染的銳器采取高度防護(hù)措施;⑤要注意有些感染是通過消化道、皮膚和黏膜造成的,在操作上要特別注意。
ABSL-2是在ABSL-1的操作規(guī)范、處理方法、安全設(shè)備和實(shí)驗(yàn)室要求的基礎(chǔ)上建立起來的。產(chǎn)生氣溶膠的操作程序,要在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。門保持關(guān)閉,門上懸掛公害標(biāo)志牌,有害污染廢棄物要和一般廢棄物分開放置。
1.設(shè)施設(shè)備要求
(1)適用時(shí),應(yīng)符合動(dòng)物生物安全一級(jí)防護(hù)水平的要求。
(2)動(dòng)物飼養(yǎng)間應(yīng)在出入口處設(shè)置緩沖間。
(3)應(yīng)設(shè)置非手動(dòng)洗手池或手部清潔裝置,宜設(shè)置在出口處。
(4)應(yīng)在鄰近區(qū)域配備高壓蒸汽滅菌器。
(5)適用時(shí),應(yīng)在安全隔離裝置內(nèi)從事可能產(chǎn)生有害氣溶膠的活動(dòng);排氣應(yīng)經(jīng)HEPA過濾器的過濾后排出。
(6)應(yīng)將動(dòng)物飼養(yǎng)間的室內(nèi)氣壓控制為負(fù)壓,氣體應(yīng)直接排放到其所在的建筑物外。
(7)應(yīng)根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的結(jié)果,確定是否需要使用HEPA過濾器過濾動(dòng)物飼養(yǎng)間排出的氣體。
(8)當(dāng)不能滿足(5)時(shí),應(yīng)使用HEPA過濾器過濾動(dòng)物飼養(yǎng)間排出的氣體。
(9)實(shí)驗(yàn)室的外部排風(fēng)口應(yīng)至少高出本實(shí)驗(yàn)室所在建筑的頂部2m,應(yīng)有防風(fēng)、防雨、防鼠、防蟲設(shè)計(jì),但不應(yīng)影響氣體向上空排放。
(10)污水(包括污物)應(yīng)消毒滅菌處理,并應(yīng)對(duì)消毒滅菌效果進(jìn)行監(jiān)測,以確保達(dá)到排放要求。
2.標(biāo)準(zhǔn)微生物學(xué)操作規(guī)范
(1)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室主任必須制定動(dòng)物管理操作和進(jìn)入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)遵循的規(guī)章、程序和方法。為處理緊急事故,還應(yīng)制定應(yīng)對(duì)意外事故的規(guī)章,對(duì)策和處理辦法。
(2)限制進(jìn)入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室人員的數(shù)量,越少越好。在實(shí)驗(yàn)工作進(jìn)行之前,實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人要告知進(jìn)行操作和輔助工作人員,實(shí)驗(yàn)室內(nèi)可能發(fā)生和存在的潛在生物危害。
(3)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定適當(dāng)?shù)尼t(yī)學(xué)監(jiān)督和監(jiān)測方案。所有工作人員,對(duì)其正在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的病原微生物或潛在感染的疾病(如乙型肝炎、結(jié)核等),應(yīng)接受及時(shí)的免疫接種和必要的檢測試驗(yàn)。
(4)在工作區(qū)內(nèi)不允許飲食、吸煙、處理隱形眼鏡片和使用化妝品。食物儲(chǔ)藏只能在指定的區(qū)域內(nèi),不允許在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室或處理室內(nèi)存放。
(5)操作應(yīng)仔細(xì)小心,使氣溶膠和濺射物產(chǎn)生減至最低限度。
(6)處理與傳染物有關(guān)的工作結(jié)束后,特別是當(dāng)傳染物明顯溢出,濺出或受傳染材料污染后,實(shí)驗(yàn)室設(shè)備和工作臺(tái)面應(yīng)用有效消毒劑進(jìn)行常規(guī)的除污消毒。然后再送去修理或維護(hù)保養(yǎng)。
(7)對(duì)全部傳染性樣品都要進(jìn)行詳細(xì)收集,明確標(biāo)注,穩(wěn)妥運(yùn)輸和仔細(xì)處理,以杜絕有害病原體向外界傳播。從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室收集到的所有廢棄物包括動(dòng)物組織、尸體、污染墊料、沒吃完的飼料、銳器和其他廢物,都要放在一個(gè)密封、有蓋的容器內(nèi),然后按規(guī)定進(jìn)行嚴(yán)格處理。裝廢料的容器表面在倒出廢料之前要消毒。如廢料進(jìn)行燃燒處理,處理前廢料要進(jìn)行高壓滅菌。
(8)制定處理銳器的安全措施包括:①針頭和注射器或其他銳利器材嚴(yán)格限制在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)使用,只在無可替代的器材時(shí)才能使用,如非腸道注射藥物,靜脈切開放血,抽取實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體液,以及從有隔膜的瓶子里吸出液體等。②只能用固定針頭或一次性注射器,注射或抽取感染性材料。使用過的一次性針頭不要弄彎,截?cái)?,損壞,應(yīng)重新套上保護(hù)套管,從注射器上取下。在拋棄之前,不要用手接觸。換言之,它們必須小心地放置在方便、穿不透的用來存放銳器的盒子里。不能拋棄的銳器必須放在專用的硬容器內(nèi),在轉(zhuǎn)移到消毒區(qū)之前,最好先進(jìn)行高壓滅菌。③不要用手直接處理破碎的玻璃制品,要用刷子、簸箕、夾子或鑷子等工具。裝有污染針頭、銳器和破碎玻璃的容器,根據(jù)規(guī)定,在丟棄之前要消毒。④培養(yǎng)物、組織或體液標(biāo)本在收集、處理、加工、貯存、運(yùn)輸期間要放在防漏的容器里。盡量用塑料制品,不用玻璃制品。
(9)在處理完培養(yǎng)物和動(dòng)物,脫掉手套之后,離開實(shí)驗(yàn)室之前,要洗手。
(10)在進(jìn)行有傳染病原體實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室入口處,要懸掛注明“有危害”的警告標(biāo)牌。危險(xiǎn)警告標(biāo)志牌上要標(biāo)明現(xiàn)用的傳染病原體,實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人姓名和電話號(hào)碼,以及其他特殊要求(包括進(jìn)入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室要免疫預(yù)防注射,佩戴呼吸面罩等)。
(11)有效控制蚊蠅及嚙齒類動(dòng)物。
3.特殊操作規(guī)范
(1)要編制生物安全手冊。要向有關(guān)人員告知實(shí)驗(yàn)的特殊危險(xiǎn)并要求他們閱讀和遵循相關(guān)規(guī)范和程序。實(shí)驗(yàn)室人員要接受培訓(xùn),內(nèi)容為與工作有關(guān)的潛在危險(xiǎn),防止暴露的必要措施和評(píng)定暴露感染的程序。人員每年要接受上述內(nèi)容的新培訓(xùn),或根據(jù)程序或政策的變化另外進(jìn)行培訓(xùn)。培訓(xùn)記錄要妥善保存。
(2)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人要限制進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的人員。在一般情況下,微生物實(shí)驗(yàn)室或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不允許易被感染或感染后可能會(huì)有非常危險(xiǎn)的人員進(jìn)入。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人根據(jù)具體情況,確定哪些人可以進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室或在其中工作。
(3)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定相應(yīng)規(guī)則和程序,只允許那些了解潛在生物危險(xiǎn)并符合進(jìn)行特殊實(shí)驗(yàn)規(guī)定(如免疫)的人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室。
(4)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)穿外衣、長服、工作服或制服,離開實(shí)驗(yàn)室到非實(shí)驗(yàn)區(qū)(休息室、圖書室、辦公室)時(shí),應(yīng)脫下防護(hù)服,或罩上未在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)用過的清潔外衣。
(5)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)無關(guān)的動(dòng)物不允許放在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。
(6)發(fā)生明顯感染性材料的溢出和其他事故時(shí)要及時(shí)報(bào)告實(shí)驗(yàn)室主任,并立即進(jìn)行危險(xiǎn)評(píng)估、監(jiān)督處理,并保存記錄。